Неудачные попытки ЭКО. В чем причина????

[OlgaSemyenova]

Здравствуйте. У меня вопрос для Бориса Александровича и Маргариты Бениаминовны. Закончился третий протокол неудачей. Хотим услышать ваше мнение.
Мне 36лет. Вторичное бесплодие. Трубно-перитониальное бесплодие. В анамнезе в глубоко молодом возрасте два миниаборта от первого супруга. Гормоны в норме(ФСГ, ЛГ, Пролактин, тестостерон, ТТГ, АМГ). Мутаций гемостаза нет, АФС-отр, кариотип-девочка, аббераций нет.Муковисцедоз- отр. Хр. эндометрит.Гиперплазия эндометрия.
Муж 40 лет. Есть сын взрослый в первом браке. AZF, муковисц- отр. Кариотип-мальчик, абберац- 1%полиплоидий. ЭМИС- содержание интактн головок с норм хроматином 8%. Незрелый хроматин-44%.

1-ый протокол (по квоте). Короткий (гонал, цетротид)- 8 фолликулов, на пункции 4 ооцита, ни один не оплодотворился. Поменяли клинику на "нормальную"

2-ой протокол. Короткий(пурегон, луверис,оргалутран). 8 фолликулов. На пункции 9 ооцитов. Зрелых-8. Сперма на па пункции: объем 4,0мл. А-20%, В-30%. Концентрация 40,0 млн/мл. Морфология 15%. Это после стимуляции сперматогенеза.
Оплодотворение ИКСИ: 2PN-4, 0PN-3, 1PN-1.
На второй день: у которых 2 PN (5bc fra ueb) (6bc fra ueb) ( 4a 3/4) (6b ueb fra). У которого 1PN (4ab ueb)
На третий день : у которых 2PN (8b) (6bc fra ueb) (9ab ueb)( 7b ueb fra). У которого 1PN (5ab ueb)
Перенесли на 3 сут (8b; 9ab) Эндометрий 18 мм. 2 эмбриона оставшиеся до 5 сут не дожили. ХГЧ на 14ДПП-16. В поддержке был хорагон. Поддержку отменили. После протокола на гистероскопии эндометрит и гиперплазия. Пролечили.

3-ий протокол короткий (пурегон, луверис,оргалутран). 8 фолликулов, на пункции 8, зрелых-7. Сперма на пункции 4,0мл, А-6%, В-23%, Концентрация 46,0млн/ мл. Морфология 12%.
Оплодотворение ИКСИ (NASUM) 2PN-6; 1PN-1
На второй день: у которых 2PN (2 pb gra) (5b fra ueb) (5b fra ueb) ( 4b fra ueb CLV) (4b fra ueb) (5cd fra ueb) у которого 1PN (3b fra)
На третий день: у которых 2PN (deg) (7b fra ueb) (9b fra ueb) (7ab fra ueb ) (5b fra ueb) (7cd fra ueb) у которого 1PN (5bfra)
Закриоконсервировали на 3 сут (7b; 9b; 7ab; 5b), так как эмбриолог предложила сделать перенос в криоцикле. Подготовили эндометрий и перенесли в криоцикле на блокаде 9b; 7ab. Эндометрий 10мм.
На 14ДПП ХГЧ-144, на 16ДПП-46, на 19ДПП-19 (на УЗИ 2ПЯ 2,7мм и 2,3мм), на 21ДПП ХГЧ-9. Поддержку отменили.

Ваш взгляд на качество и развитие эмбрионов? Что бы вы посоветовали нам? Стоит мне пытаться со своими клетками или брать ДЯ? До бластоцист мы не доращивали в третьем протоколе потому что я побоялась и не дала согласие. Остались замороженные эмбрионы 7 аb, 5b. Спасибо

[OlgaSemyenova]

И еще я хотела спросить ваше мнение об этой статье

BLASTOMERE CLEAVAGE SYNCHRONICITY IN NONINVASIVE SELECTION OF EUPLOID EMBRYOS WITH HIGH IMPLANTATION POTENTIAL


Introduction:
We have developed a new noninvasive method of euploid embryo selection based on the hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres are mostly euploid with greater likelihood of implantation, and that aneuploid embryos tend to cleave asynchronously. It was reported that chromosome segregation during meiosis or mitosis in human does not occur simultaneously and randomly. The time period necessary for
complete chromosome segregation depends on the number of chromosomes; it varies for aneuploid and euploid cells of the same species. We hypothesized that the cell cycle duration also depends on the ploidy of the cells of the same type and same species. Given that aneuploidy of blastomeres leads to embryo mosaicism, we assumed that blastomeres of mosaic embryos do not cleave synchronously due to the different cell cycle duration
of cells with varying number of chromosomes. Blastomere division synchronicity in preimplantation embryos might become an efficient noninvasive criterion for selecting euploid embryos for embryo transfer, partially replacing preimplantation genetic diagnosis (PGD) for aneuploidy. The aim of this study is to prove our hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres have higher probabilities to implant and aneuploid embryos cleave mostly asynchronously.
Materials and Methods:
A mathematical model was developed to calculate the probability of implantation for an individual embryo based on the pregnancy outcome of 6032 in vitro fertilization (IVF) cycles with one or two embryos transferred, which took place between 2004 and 2010. Cleavage was deemed synchronous if the embryo had 4 blastomeres on Day 2 and 8 cells on Day 3 of cultivation. We calculated the implantation probability for embryos with 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, and 12 blastomeres on Day 3, as well as the probability of singleton and multiple pregnancies and the
selection of the pair of embryos best for transfer. The cleavage synchronicity rate was calculated for each type of aneuploidy.
Results:
Synchronously cleaving embryos with 8 blastomeres on Day 3 of development had the highest probability to implant (0.366±0.012). The implantation probability of the embryos with 4 cells on Day 3 and synchronous cleavage was 0.301±0.034.
The 6-cell Day 3 embryos with asynchronously cleavage were characterized by the markedly lower probability of implantation (0.197±0.019); embryos with speediest cleavage (attaining 12 blastomeres on Day 3) had the lowest implantation probability (0.118±0.062). PGD for aneuploidy of 278 embryos demonstrated correlation between cell division synchronicity and aneuploidy of embryos; 80% of embryos with aneuploidy detected by PGD
divided asynchronously, whereas 53% of euploid embryos divided synchronously. Thus, PGD has confirmed our hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres tend to be euploid with good implantation prognosis. The link between the synchronicity of embryo cleavage and aneuploidy rate provides us with a instrument for noninvasive selection of embryos in order to minimize fetal abnormalities and decrease the
frequency of multiple pregnancies.

[Маргарита Аншина]

Сообщение от OlgaSemyenova

Стоит мне пытаться со своими клетками или брать ДЯ? До бластоцист мы не доращивали в третьем протоколе потому что я побоялась и не дала согласие. Остались замороженные эмбрионы 7 аb, 5b. Спасибо

На мой взгляд, нет оснований для ДЯ. Когда есть риск или страх, что эмбрионы не доживут до 5 суток, мы предпочитаем двойной перенос: один переносим на 3-сутки, второй на 5-е. Либо перносим два на 3-и сутки, а те, что дойдут до бластоцисты на 5-е сутки, замораживаем. Оставшиеся эмбрионы, конечно, надо перенести.

[Маргарита Аншина]

Сообщение от OlgaSemyenova

И еще я хотела спросить ваше мнение об этой статье

BLASTOMERE CLEAVAGE SYNCHRONICITY IN NONINVASIVE SELECTION OF EUPLOID EMBRYOS WITH HIGH IMPLANTATION POTENTIAL


Introduction:
We have developed a new noninvasive method of euploid embryo selection based on the hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres are mostly euploid with greater likelihood of implantation, and that aneuploid embryos tend to cleave asynchronously. It was reported that chromosome segregation during meiosis or mitosis in human does not occur simultaneously and randomly. The time period necessary for
complete chromosome segregation depends on the number of chromosomes; it varies for aneuploid and euploid cells of the same species. We hypothesized that the cell cycle duration also depends on the ploidy of the cells of the same type and same species. Given that aneuploidy of blastomeres leads to embryo mosaicism, we assumed that blastomeres of mosaic embryos do not cleave synchronously due to the different cell cycle duration
of cells with varying number of chromosomes. Blastomere division synchronicity in preimplantation embryos might become an efficient noninvasive criterion for selecting euploid embryos for embryo transfer, partially replacing preimplantation genetic diagnosis (PGD) for aneuploidy. The aim of this study is to prove our hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres have higher probabilities to implant and aneuploid embryos cleave mostly asynchronously.
Materials and Methods:
A mathematical model was developed to calculate the probability of implantation for an individual embryo based on the pregnancy outcome of 6032 in vitro fertilization (IVF) cycles with one or two embryos transferred, which took place between 2004 and 2010. Cleavage was deemed synchronous if the embryo had 4 blastomeres on Day 2 and 8 cells on Day 3 of cultivation. We calculated the implantation probability for embryos with 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, and 12 blastomeres on Day 3, as well as the probability of singleton and multiple pregnancies and the
selection of the pair of embryos best for transfer. The cleavage synchronicity rate was calculated for each type of aneuploidy.
Results:
Synchronously cleaving embryos with 8 blastomeres on Day 3 of development had the highest probability to implant (0.366±0.012). The implantation probability of the embryos with 4 cells on Day 3 and synchronous cleavage was 0.301±0.034.
The 6-cell Day 3 embryos with asynchronously cleavage were characterized by the markedly lower probability of implantation (0.197±0.019); embryos with speediest cleavage (attaining 12 blastomeres on Day 3) had the lowest implantation probability (0.118±0.062). PGD for aneuploidy of 278 embryos demonstrated correlation between cell division synchronicity and aneuploidy of embryos; 80% of embryos with aneuploidy detected by PGD
divided asynchronously, whereas 53% of euploid embryos divided synchronously. Thus, PGD has confirmed our hypothesis that embryos with synchronously cleaving blastomeres tend to be euploid with good implantation prognosis. The link between the synchronicity of embryo cleavage and aneuploidy rate provides us with a instrument for noninvasive selection of embryos in order to minimize fetal abnormalities and decrease the
frequency of multiple pregnancies.

Описанный подход - один из стандартных критериев, которые используют при отборе эмбрионов.

[OlgaSemyenova]

Спасибо. Маргарита Бениаминовна, правильно ли я поняла, что эмбрионы нормального качества? И стоит дальше продолжать со своими клетками? Дело в том, что в клинике, в которой я прохожу ЭКО настаивают на плохом качестве ооцитов, что приводит к анэуплоидиям (этот вывод делают из-за неравновесности эмбрионов как по количеству бластомеров, так и их неравных размеров).Так ли это? Я знаю, что идеальные эмбрионы- это 2 день-4бластомера, 3 день- 8 бластомеров и они равные по размерам. Но говорит ли это о том, что наши эмбрионы не жизнеспособны? Есть ли преимущества переноса на 3 сут и на 5 сут в моем случае? И может быть мне выбрать другой протокол стимуляции? Какой? Может ли он привести к изменению качества ооцитов? В последних двух у меня было ежедневно пурегона 225 + луверис 75 (9 дней)+ с 7 дня оргалутран. Хорагон 10 тыс на 10 день.

[Маргарита Аншина]

Идеальные эмбрионы бывают достаточно редко. Всегда лучше переносить эмбрионы на 5 сутки, если они доживают до 5 суток. Поэтому внимательно почитайте мой предыдущий ответ. Что касается протокола стимуляции, заочно трудно его оценивать, надо видеть яичники.

[OlgaSemyenova]

Спасибо. А нужны ли нам какие то дополнительные обследования?Это если будет опять неудачная попытка с замороженными эмбрионами. Например для мужа TUNEL или FISH спермы. Или диагоностика полярных телец для моих ооцтов? Или просто идти в следующую попытку не обследуя больше ничего?

[Маргарита Аншина]

Не думаю, что в вашем случае эти исследования полезны.

[OlgaSemyenova]

Спасибо Вам за ваши ответы